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六合历史开奖结果

发布时间:2018-09-22 来源:香港马会资料

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肺癌细胞 A549只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。细胞相关操作(注意:细胞操作都需严格按照无菌操作)

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肺癌细胞 A549

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干冰运输

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肺癌细胞 A549质量控制: 本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIVHBVHCV)、支原体。

培养条件:37℃,5% CO2PH 值7.2~7.4,无菌恒温培养。

用途: 本产品只提供给进一步的科研使用,不可应用于治疗等其他方面。细胞相关操作(注意:细胞操作都需严格按照无菌操作)

收到复苏好的贴壁细胞的处理方法:

  • 先从外包装盒拿出细胞瓶,在细胞瓶表面喷一层酒精,并小心去掉封口膜;
  • 在显微镜下观察细胞状态,并确定是否染菌,如有染菌,请立即拍照,并将细胞丢掉;
  • 将培养瓶置于 37°C5% CO2 的无菌培养箱中培养 4-6 小时;
  • 倒掉多余的培养基,留正常体积的培养基;
  • 重新将培养瓶置于 37°C5% CO2 的无菌培养箱中培养过夜
  • 第二天传代。

收到冻存的处理方法: 1.37°C 水浴预热培养基;

2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C 水浴快速解冻(解冻后不要继续暖细胞);

3.在超净台中加入5ml 培养基重悬细胞,1000rpm 离心5min

4.弃上清,加入5ml 培养基重悬细胞后转入 T25培养瓶中,轻轻晃匀;

5.置于37°C,5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧)

6.第二天,用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

传代

1.当细胞融合度达到90%以上时,给细胞传代;

2.37°C 水浴预热培养基;

3.在超净台中,弃培养基,加入2-5mlPBS 清洗细胞后,再加入1ml 胰酶消化细胞;

4.显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,加入5ml 培养基终止消化;

5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;

6.将细胞移入离心管中,1000rpm 离心5min

7.弃上清,加入15-20ml 的培养基重悬细胞后转入 T75培养瓶中或按适当比例传到 T25瓶中(确保细胞贴壁

后融合度在25-50%之间),细胞密度在1×104  cells/cm2  (2.5×105  cells/T-25瓶),混匀细胞悬液,确保均匀分布;

8.将培养瓶置于37°C5% CO2的无菌培养箱中培养。细胞冻存

1.37°C 水浴预热培养基;

2.消化细胞后给细胞计数:

 

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